《植物生理学报》 2009, 45(6): 603-606

水稻胚性悬浮细胞的包埋脱水法超低温保存

曾博雅, 王智, 张云峰, 杨清*, 陆巍*

南京农业大学生命科学学院, 南京210095

通信作者：杨清；E-mail: qyang19@njau.edu.cn, luw@njau.edu.cn；Tel: 025-84395221

摘　要：

用包埋脱水法冷冻保存水稻胚性悬浮细胞。整个过程包括: 胚性悬浮细胞预培养、细胞包埋、二次预培养、包埋细 胞脱水、液氮冰冻、细胞解冻和冷冻细胞恢复培养。结果表明, 在细胞水分含量为 25.17% 和蔗糖浓度依次递增以及第 2 次预培养 3~4 d 的存活率最好。在培养基中加 2.5 g•L-1 活性炭有利于细胞的恢复生长。细胞恢复培养后, 能再产生愈伤组 织, 但生长变慢, 有约 5 d 的滞后期。

关键词：水稻; 悬浮细胞系; 包埋脱水; 冰冻保存

收稿：2009-03-25   修定：2009-05-04

资助：江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室基金(HZHL0807)。

Cryopreservation of Rice (Oryza sativa L.) Embryonic Cell Suspensions by Encapsulation-Dehydration

ZENG Bo-Ya, WANG Zhi, ZHANG Yun-Feng, YANG Qing*, LU Wei*

College of Life Sciences, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China

Corresponding author: YANG Qing; E-mail: qyang19@njau.edu.cn, luw@njau.edu.cn; Tel: 025-84395221

Abstract:

用包埋脱水法冷冻保存水稻胚性悬浮细胞。整个过程包括: 胚性悬浮细胞预培养、细胞包埋、二次预培养、包埋细 胞脱水、液氮冰冻、细胞解冻和冷冻细胞恢复培养。结果表明, 在细胞水分含量为 25.17% 和蔗糖浓度依次递增以及第 2 次预培养 3~4 d 的存活率最好。在培养基中加 2.5 g•L-1 活性炭有利于细胞的恢复生长。细胞恢复培养后, 能再产生愈伤组 织, 但生长变慢, 有约 5 d 的滞后期。

Key words: 水稻; 悬浮细胞系; 包埋脱水; 冰冻保存